美蓝浓度高和染色时间过长都会增加酵母菌的死亡，美兰有氧化性，浓度太高会使活菌很快致死，浓度低老龄细胞与活细胞不易区分；染色时间短，活细胞还没从蓝变无色，观察到的活细胞数量会比预计的少，染色时间长，活细胞数量也会减少。
因为细胞膜能控制物质进出细胞，活细胞的细胞膜具有活性，能阻碍染色剂进入细胞，活细胞内无色，而死细胞的细胞膜失去了活性，不能阻碍染色剂进入细胞，死细胞内有色。所以可以用染色法区别死活细胞。
怕把活酵母菌杀死
